LÄÄKETIETEENVALMENNUSKURSSI
BI5 BIOTEKNOLOGIA 25.4.2013
1. SOLUN RAKENNE
1. Ensimmäiset solut olivat esitumaisia
2. Aitotumaiset solut ovat esitumaisia isompia jamonimutkaisempia
3. Tumallisissa soluissa on enemmän soluelimiä kuinesitumallisissa
02YJ_s6.jpg
ENSIMMÄISET SOLUT OLIVAT ESITUMAISIA
Prokaryootit
Kehittyivät n. 3,8 mrd v.s.
Pituudeltaan n. 1-10 mikrometriä
Voivat muodostaa soluryhmiä
AITOTUMAISET SOLUT OVAT ESITUMAISIAISOMPIA JA MONIMUTKAISEMPIA
Eukaryootit
Alkueliöt, sienet, kasvit ja eläimet
Kehittyivät esitumaisista n. 1,5 mrd v.s
Endosymbioositeoria
Mitokondriot ja viherhiukkaset kehittyivät yhteyttävistäbakteereista (muistuttavat kooltaan esitumaisia soluja)
Pituudeltaan n. 0,1-0,01 mm
02YJ_s7.jpg
NIMEÄ RAKENTEET
02YJ_s8_2.jpg
TUMALLISISSA SOLUISSA ON ENEMMÄNSOLUELIMIÄ KUIN ESITUMALLISISSA
02YJ_s8_1.jpg
ELÄINSOLU
KASVISOLU
SOLUT LÄHETTÄVÄT JA VASTAANOTTAVATVIESTEJÄ
Aukkoliitos
Siirtää solussa olevia ioneja ja molekyylejä naapurisoluun
Kudoshormonit eli kasvutekijät
Toimivat induktioaineina  saavat solut mm.erilaistumaan
Käynnistävät apoptoosin eli solukuoleman
02YJ_s9.jpg
MERKITSE TAULUKKOON RASTEILLAMITKÄRAKENTEET LÖYTYVÄT KUSTAKINSOLUTYYPISTÄ.
bakteerisolu
eläinsolu
kasvisolu
sienisolu
tuma
dna
tumakotelo
solukalvo
soluseinä
kapseli
solulima
soluneste
solunesterakkula
bakteerisolu
eläinsolu
kasvisolu
sienisolu
tuma
x
x
x
dna
x
x
x
x
tumakotelo
x
x
x
solukalvo
x
x
x
x
soluseinä
x
x
x
kapseli
x
solulima
x
x
x
x
soluneste
(x)
x
x
solunesterakkula
(x)
x
x
2. MIKROBIT
1. Mikrobit ovat mikroskooppisen pieniä
2. Aitotumaisiin mikrobeihin kuuluvat yksisoluiset alkueliötsekä hiiva- ja homesienet
3. Arkit eivät ole bakteereita
4. Bakteereita on kaikkialla
5. Bakteerien viljely
6. Bakteerien lisääntyminen ja perimän muuttumistavat
7. Virusten rakenne
8. Prionit – oikea aminohappojärjestys – väärä proteiini
MIKROBIT OVAT MIKROSKOOPPISEN PIENIÄ
Kuuluvat moneen eri eliökunnan ryhmään
Myös virukset ovat mikrobeja
Hyödylliset mikrobit (suolistobakteerit ja arkit)
Haitalliset mikrobit
Aiheuttavat sairauksia
LB2+
02YJ_s13.jpg
Pöytävieraat (ei hyötyä eikä haittaa)
Tuottajamikrobit
Syanobakteerit ja yhteyttävät yksisoluiset levät
Kuluttajamikrobit (esim. tohvelieläin)
Hajottajamikrobit
Symbionttiset mikrobit
Loismikrobit (esim. malarialoisio)
Zoonoosi: mikrobin aiheuttama tauti, jokatarttuu eläimestä ihmiseen
02YJ_s15.jpg
AITOTUMAISIIN MIKROBEIHIN KUULUVATYKSISOLUISET ALKUELIÖT SEKÄ HIIVAJAHOMESIENET
Alkueliöt
Yksinkertainen tumallinen solurakenne, erilaistuneidenkudosten puute
Yksisoluiset levät
Alkueläimet: toisenvaraisia ja liikkuvia
Hiivat
Yksisoluiset sienet
Energia joko aerobisesti tai anaerobisesti
Homesienet
Rihmamainen kasvu (hyyfi eli rihma)
Yksi tai useampi solu (soluseinä kitiiniä)
Sopivan kostea ja hapekas elinympäristö
Myrkkyjen eritys (jotkin lajit)
ARKIT EIVÄT OLE BAKTEEREITA
Solukalvon kemiallinen rakenne poikkeaa bakterien jaaitotumaisten soluista (soluseinä proteiinia)
Geeneissä introneita
Haastavat elinympäristöt (esim. kuumat lähteet,suolajärvet)
Arkit ja muut lajit keskenään mutualistisia
02YJ_s16_1.jpg
BAKTEEREITA ON KAIKKIALLA
Omavaraiset eli autotrofiset bakteerit
Fotosynteettiset bakteerit (esim. syanobakteerit)
Rihmamaiset muodostelmat
Yhteyttävät Auringon valon avulla
Kemosynteettiset (kemiautotrofiset) bakteerit (esim.maaperän nitrifioivat bakteerit)
Energia yhteyttämiseen ammoniakki-, rauta- tai rikkiyhdisteitähapettamalla
Toisenvaraiset bakteerit
Orgaaniset yhdisteet muilta eliöiltä
02YJ_s16_2.jpg
02YJ_s17_1.jpg
02YJ_s17_1.jpg
A = basilli
B = diplokokki
C = streptokokki
D = stafylokokki
E = spirilli
F = siima
G = karva
H = kapseli
I = soluseinä
J = solukalvo
K = solulima
L = ribosomit
M = kromosomi
N = plasmidi
O = bakteerien ryhmissä tavattava itiötyyppi
BAKTEERIEN VILJELY
Sopivat kasvatusolosuhteet
Petrimaljalla oleva agar-hyytelö
LB2+
02YJ_s17_2.jpg
BAKTEERIEN LISÄÄNTYMINEN JA PERIMÄNMUUTTUMISTAVAT
Suvuton jakautuminen
Epäsuotuisissa olosuhteissa bakteerit lepoitiöitä
Bakteerin perimässä useita plasmideja, mutta vainyksi kromosomi
Bakteerien perimän muutokset
Mutaatiot
Transformaatio
Dna:ta bakteerisoluun ulkopuolelta
Transduktio
Bakteriofagi-viruksen perimän mukana aiempien isäntäsolujenperimää bakteerisoluun
Konjugaatio
Bakteeri yhtyy viereiseen bakteeriin piluksen avulla
BAKTEERIEN LISÄÄNTYMINEN
02YJ_s18_1.jpg
02YJ_s18_2.jpg
02YJ_s18_3.jpg
VIRUSTEN RAKENNE
Ei omaa solurakennetta eikä aineenvaihduntaa
Tarvitsee isäntäsolun lisääntyäkseen (loisia)
Eri eliöillä on omat viruksensa
Perimä dna:ta tai rna:ta
02YJ_s20_1.jpg
02YJ_s22.jpg
02YJ_s22.jpg
RNA-VIRUS
DNA-VIRUS
RETROVIRUS
BAKTERIOFAAGI
02YJ_s20_2.jpg
BAKTERIOFAAGIN LISÄÄNTYMINEN
DNA-VIRUKSEN LISÄÄNTYMINEN
02YJ_s21.jpg
RETROVIRUKSEN LISÄÄNTYMINEN
02YJ_s21_2.jpg
NIMEÄ VIRUKSEN OSAT
02YJ_s27.jpg
Viruksen osat ovat a= vaipan proteiinisauva, B=vaippa, C= proteiinikuori , D= viruksen perimä.
02YJ_s27.jpg
PRIONIT – OIKEA AMINOHAPPOJÄRJESTYS –VÄÄRÄ PROTEIINI
Prionitaudit aiheutuvat proteiinista
Elimistön normaali proteiini muuttuu vääränmuotoiseksiprioniksi
Prionin kosketus muuttaa normaalin proteiniinin prioniksi
Yhteistä keskushermoston tuhoutuminen
LB2+
02YJ_s25.jpg
02YJ_s25.jpg
RYHMÄTEHTÄVÄ
Selitä omin sanoin, miksi virukset eivät oleeläviä organismeja.
Jos Turkuun julistettaisiin virusepidemia, miten
a. terveydenhuollon pitäisi toimia?
b. pitäisi toimia, jotta virus ei pääsisi etenemäänlaajemmalle alueelle?
Selitä, miksi antibiootit tehoavat bakteereihin,mutta eivät viruksiin
VASTAUKSET
Virukset eivät muodostu soluista. Ne eivät voituottaa itsekseen proteiineja. Ne eivät voikäyttää energiaa.
Terveydenhuollon pitää valmistautua ottamaanvastaan potilaita, jotka ovat kyseisen virukseninfektoimia. Lisäksi heidän pitää varatariittävästi lääkkeitä, jotka helpottavat taudinoireita. Jos tautiin on ennaltaehkäisevä rokote,rokotuskampanja pitää aloittaa välittömästi.Myös karanteeni mahdollisuus pitää ollaolemassa.
b. Asiasta on tärkeää tiedottaa, viruksen leviämistiepitää selvittää ja jos mahdollista, se pitää tukkia
Antibiootit häiritsevät bakteerisolun toimintoja.Koska virukset eivät muodostu solusta, häirintäei toimi niillä.
3. PERIMÄN RAKENNE JA TOIMINTA
1. Perinnöllinen informaatio sijaitsee dna:ssa elideoksiribonukleiinihapossa
2. Dna sijaitsee kromosomeissa
3. Dna:n kahdentuminen ja solujen jakautuminensiirtää perimätiedon eteenpäin
4. Geenit ohjaavat RNA-molekyylien muodostumista
5. Valkuaisaineet eli proteiinit muodostuvat rna-molekyylien välityksellä
6. Geenien toimintaa säädellään monella eri tasolla
7. Mutaatiot muuttavat perimän viestiä
8. Sukusoluissa tapahtuvat mutaatio siirtyyjälkeläisille ja luonnonvalinnan arvioitavaksi
PERINNÖLLINEN INFORMAATIO SIJAITSEEDNA:SSA ELI DEOKSIRIBONUKLEIINIHAPOSSA
Dna
Kaksoiskierre
Kaksi sokerifosfaattirunkoa
Nukleotidi
Dna:n rakenneosa
Koostuu sokeri-, fosfaatti- ja emäsosasta
Emäsparisääntö: A:T, G:C
02YJ_s29.jpg
02YJ_s29.jpg
DNA SIJAITSEE KROMOSOMEISSA
Esitumaisilla eliöillä on yksi kromosomi jarengasmaisia dna-molekyylejä
Perimä haploidi
Aitotumaisilla dna sijaitsee pääosin tumankromosomeissa
Perimä diploidi tai polyploidi
02YJ_s30_1.jpg
02YJ_s30_2.jpg
02YJ_s30_2.jpg
02YJ_s30_1.jpg
DNA:N KAHDENTUMINEN JA SOLUJENJAKAUTUMINEN SIIRTÄÄ PERIMÄTIEDON ETEENPÄIN
Kahdentuminen tapahtuu ennen solun jakautumista
Kumpikin juoste toimii uuden juosteen mallina
Replikaatio
Emäsparien väliset vetysidokset katkeavat
Etenee aloituskohdasta kumpaankin suuntaan
Dna-polymeraasientsyymi rakentajana
Vastinjuosteet kopioituvat vastakkaisiin suuntiin
02YJ_s31.jpg
GEENIT OHJAAVAT RNA-MOLEKYYLIENMUODOSTUMISTA
Geenissä säätelyalue ja rna-molekyyliksi kopioitavaalue
Eksoni sisältää tiedon proteiinisynteesistä
Introni (eksonien välissä) eivät sisällä tietoa poistetaan ennen esiaste-rna:sta ennenproteiinisynteesiä
Toistojaksot tarjoavat materiaalia dna-sormenjälkiävarten
Säätelyalueet ohjaavat geenien toimintaa:
Promoottorialueeseen kiinnittyy dna-polymeraasi
Käynnistävät transkription
Transkriptiofaktorit kiinnittyvät säätelyalueisiin jatehostajajaksoihin  säätelevät kaksoiskierteenaukeamista ja rna-polymeraasin toimintaa
VALKUAISAINEET ELI PROTEIINIT MUODOSTUVATRNA-MOLEKYYLIEN VÄLITYKSELLÄ
Proteiinisynteesi alkaa, kun lähetti-rna kiinnittyyribosomiin solulimassa
Siirtäjä-rna:t kuljettavat aminohappoja ribosomille.
Lähetti-rna:n jokaista erilaista kodonia varten on omasiirtäjä-rna-molekyylinsä.
Aloituskolmikko aina ATG (metioniini)
mallijuoste TAC
lähetti-rna AUG
siirtäjä-rna UAC
Antikodoni eli siirtäjä-rna:n tunnistuskolmikkopariutuu lähetti-rna:ssa emäsparisäännön mukaan
Lopetuskodonit ovat ATT, ATC ja ACT
02YJ_s33.jpg
Tuottajageenit
Ohjaavat solun rakenneproteiinien ja entsyymienmuodostumista
Reagoivat säätelygeenien tuottamiin säätelytekijöihin
Säätelygeenit
Säätelevät muiden geenien toimintaa mm. proteiinienavulla
Säätelevät: geenien transkriptiota, lähetti-rna:nmuokkausta, kulkeutumista solulimaan, hajotusta sekäproteiinisynteesiä.
Silmukointi: esiaste-rna:n vaihtoehtoinen muokkaus yhdestä geenistä voidaan tuottaa kymmeniäerilaisia proteiineja
GEENIEN TOIMINTAA SÄÄDELLÄÄN MONELLAERI TASOLLA
02YJ_s32.jpg
Mutageenit
Radioaktiivinen säteily, UV-säteily ja dna:n kanssareagoivat kemikaalit
Suurin osa aiheuttaa syöpää
Mutaatiotyypit
Pistemutaatio (yksittäinen emäs muuttuu)
Kromosomimutaatio (kromosomin rakenne muuttuu)
Häviämä eli deleetio
Kahdentuma eli duplikaatio
Säätelygeeneissä tapahtuvat mutaatiot voivatvaikuttaa useiden geenien toimintaan
MUTAATIOT MUUTTAVAT PERIMÄN VIESTIÄ
02YJ_s36_1.jpg
02YJ_s36_2.jpg
02YJ_s37_1.jpg
02YJ_s37_2.jpg
02YJ_s37_3.jpg
02YJ_s37_2.jpg
Suurin osa tapahtuu somaattisissa soluissa  eivätperiydy
Jos tapahtuu kehittyvissä ja runsaasti jakautuvissakudoksissa, virhe periytyy  solu ei pysty korjaamaanvirhettä  syöpä tai kehityshäiriö
Jos mutaatio tapahtuu sukusolulinjan eli ituradansoluissa, se periytyy
Mutaation vaikutukset:
haitallinen
neutraali
hyödyllinen
SUKUSOLUISSA TAPAHTUVA MUTAATIO SIIRTYYJÄLKELÄISILLE JA LUONNONVALINNANARVIOITAVAKSI
Yhdistä kirjaimilla (a-h) merkitty käsitetarkimmin sitä vastaavaan numerolla (I-VIII)merkittyyn käsitteeseen.
a) aaploidi b) diploidi c) polyploidi d) iturata e)replikaatiohaarukka f) silmukointi g)antikodoni h) perimä
I) siirtäjä-rna II) dna:n kahdentuminen III)sukusolujen muodostama solulinja sukupolvestatoiseen IV) ihmisen somaattinen solu V)ihmisen sukusolu VI) 5n VII) yksilön kaikki dnaVIII) esiaste-rna
a)haploidi  -  V) ihmisen sukusolu
b)diploidi   - IV) ihmisen somaattinen solu
c)polyploidi  - VI) 5n
d)iturata - III) sukusolujen muodostamasolulinja sukupolvesta toiseen
e)replikaatiohaarukka - II) dna:nkahdentuminen
f)f) silmukointi  - VIII) esiaste­-rna
g)g) antikodoni  - I) siirtäjä­-rna
h)h) perimä - VII) yksilön kaikki dna
4. GEENITEKNIIKAN PERUSMENETELMIÄ
1. Dna:n ja rna:n käsittely
2. Dna:n muokkaaminen
3. Dna:n ja rna:n tutkimusmenetelmiä
4. Geenien toiminnan tutkiminen
02YJ_s43.jpg
DNA:N JA RNA:N KÄSITTELY
Eristäminen
Puhdistaminen
Lähetti-rna:t voidaan vielämuuntaa niiden emäsjärjestystävastaavaksi ns.komplementaariseksi dna:ksi
DNA:N MUOKKAAMINEN
Katkaisuentsyymit
Bakteerien luontainen puolustuskeino
Pilkkovat dna:n halutusta kohdasta
Samalla entsyymillä katkaistut dna:t voidaanliittää helposti yhteen
Liittäjäentsyymit
Liittää katkaistut juosteet yhteen
Yhdistää myös eri alkuperää olevaa dna:ta
02YJ_s44_2.jpg
02YJ_s44_1.jpg
02YJ_s44_2.jpg
02YJ_s44_1.jpg
DNA:N JA RNA:N TUTKIMUSMENETELMIÄ1/2
Monistaminen PCR:n avulla tai liittämällätutkittava alue bakteerin plasmidiin
PCR
Alukkeet
Hyödynnetään mm. dna:n emäsjärjestyksenselvittämisessä eli sekvensoinnissa ja yksilöidentunnistuksessa
Elektroforeesi
Käytetään erimittaisten dna- ja rna-palastenhavaitsemiseen
Geenin dna:n erojen tutkiminen
Dna:n hybridisaatio
Dna:n juosteiden irrottaminen toisistaankuumentamalla
02YJ_s45.jpg
DNA:N JA RNA:N TUTKIMUSMENETELMIÄ2/2
Koetin:
Merkitään leimaamalla fluoresoivalla väriaineella tairadioaktiivisella merkillä
Koetin ja tutkittava kohde pariutuvat keskenään
Sekvensointi
Dna:n emäsjärjestyksen selvittäminen
Sekvenssit tallennetaan tietokantoihin
02YJ_s46.jpg
02YJ_s47.jpg
02YJ_s49.jpg
02YJ_s50.jpg
02YJ_s51.jpg
02YJ_s47.jpg
GEENIEN TOIMINNAN TUTKIMINEN
Geeni toimii, kun se tuottaa lähetti-rna:ta
Geeniekspressiota tutkitaan mittaamalla lähetti-rna-molekyylien määrä
Dna-siru
lasista tai muovista valmistettu pieni levy, johonon kiinnitetty DNA-palasia
Voidaan tutkia ympäristötekijöiden,ravintoaineiden tai lääkehoitojen vaikutustageenien toimintaan
Voidaan havaita yksilöiden välisiä eroja dna:nemäsjärjestyksessä
02YJ_s51.jpg
02YJ_s51.jpg
Nimeä molekyyli, menetelmä tai laite.
a)dna:n emäsjärjestyksenmäärittäminen
b)dna:n monistaminen
c)erimittaisten dna-jaksojenerottaminen toisistaan
d)geenien toiminnan tutkiminen
e)eri eliöiden dna:ta sisältävämolekyyli